一、前言
飼料,是所有人飼養(yǎng)的動物的食物的稱,比較狹義地一般飼料主要指的是農業(yè)或牧業(yè)飼養(yǎng)的動物的 食物。飼料包括大豆、豆粕、玉米、魚粉、氨基酸、雜粕、乳清粉、油脂、肉骨粉、谷物、飼料添加劑等 十余個品種的飼料原料。
飼料的有多種分類方式,按成分分:含大量淀粉的飼料、含糖的飼料、含油的飼料,含糖的飼料、含 蛋白的飼料、綠飼料和其他飼料;按原材料分:粗飼料、青綠飼料、青貯飼料、能量飼料、蛋白質補充飼 料、礦物質飼料;按飼料配方,飼料可以分:能量飼料、蛋白質飼料、礦物質飼料。不同種類飼料之間, 飼料中淀粉含量有很大區(qū)別,因此飼料中淀粉含量的測定對于研究動物對碳水化合物營養(yǎng)代謝與調節(jié)具有 重要意義。
本次實驗根據國標 GB/T 20194-2018 動物飼料中淀粉含量的測定 旋光法 規(guī)定,將試樣用稀鹽酸分解, 將溶解的淀粉糊化并部分水解。本文使用上海佳航Digipol-P610全自動旋光儀測定不同種類飼料的澄清溶液的 旋光度,校正因溶于 40%乙醇的其他物質及稀鹽酸處理后光學活性引起的旋光度,從而計算出的淀粉含量, 操作簡單,結果準確, 旨在制定高質量方案為化驗工作者提供些許幫助。
二、儀器與試劑
2.1、儀器
Digipol-P610全自動旋光儀,水浴鍋,分析天平等
2.2、試劑
乙醇(40%),0.31mol/L 鹽酸,3. 1mol/L 鹽酸,亞鐵*,乙酸鋅(以上試劑均為分析純)。
三、實驗方法
3.1、耗酸量的測定
稱取約 2.5g 制備好的試樣,定量轉移到 50mL 錐形瓶中,加入 25mL 水,振搖至形成均勻的懸濁液。 將 pH 計的電極至于懸濁液中,用滴定管滴加鹽酸(0.31mol/L)至 pH 為 3.0±0. 1 ,劇烈振搖懸濁液,并靜 置 2min,檢查試樣所消耗的鹽酸是否平衡,如果在此過程中,pH 升高過 3. 1,再用滴定管滴加鹽酸溶液, 必要時可多次滴加鹽酸,直到不需要更多的鹽酸為止。根據所用鹽酸溶液體積計算出試樣的耗酸量。
3.2、旋光的測定
稱取約 2.5g 制備好的試樣,到 1mg,定量轉移到干燥的 100mL 容量瓶中,加 25mL 鹽酸(0.31M), 振搖至形成均勻的懸濁液,再加人 25mL 鹽酸(0.31M) 。加人適量濃度的鹽酸,補償試樣的耗酸量,使容量 瓶中內容物的體積變化不過 1mL 。將錐形瓶浸人沸水浴中,在前 3 min ,用力振搖錐形瓶, 以避免結塊 并使懸濁液受熱均勻,振搖時錐形瓶不能離開水浴。如果 同時測定多個試樣,錐形瓶不要同時放入水浴, 每個樣品要間隔一定時間,以保持水浴沸騰。15 min 后,取出錐形瓶,立即加入溫度不過 10℃的水 30mL, 轉動錐形瓶,在流水中冷卻至 20℃左右。加入 5mL 亞鐵*溶液,振搖 1min ,加入 5mL 乙酸鋅溶液, 振搖 1min ,用水稀釋至刻度,混勻,過濾,棄去初始的數毫升溶液。用旋光儀測定濾液的旋光度。
3.3 、乙醇溶解物旋光度的測定:
稱取 5g 制備好的試樣,至 1mg 定量轉移到 100mL 干燥的容量瓶中,加 40mL 乙醇(40%) ,振搖 至形成均勻的懸濁液,然后再加 40mL 乙醇,加適當濃度的鹽酸以補充試樣的耗酸量,使瓶中內容物的體 積變化不過 1mL 。用力振搖,在室溫下靜置 1h ,在此期間至少每隔 10min 振搖一次。用乙醇稀釋至刻 度,混勻,過濾,棄去*初數毫升溶液吸取 50mL 濾液于 100mL 容量瓶,加人 2.0mL 鹽酸用力振搖,并 將其浸入沸水浴中。15min 后,從水浴中取出容量瓶,立即加溫度不過 10℃的水 30mL ,轉動容量瓶并 在冷水中冷至 20℃左右。加 5mL 亞鐵*溶液,振搖 1min ,加 5mL 乙酸鋅溶液,振搖 1min ,用水稀 釋至刻度,搖勻,過濾,棄去*初數毫升濾液。用旋光度測定濾液的旋光度。
四、結果與討論
4.1、實驗結果
經過分析檢測,飼料淀粉測定如下表 2 所示:
表 2 測試結果
飼料種類 |
樣品名稱 |
樣品序號 | (旋光) 樣品質量 /g | (乙醇溶解 物)樣品質量/g |
旋光 | 乙醇溶解物 旋光 | 淀粉含量 (g/kg) |
粗飼料(能 量飼料) |
次粉 1# | 1 |
2.50824 |
5.01400 | 2.706 | -0.018 |
297.215 |
2 | 2.706 | -0.018 | |||||
3 | 2.706 | -0.018 | |||||
次粉 3# | 1 |
2.50045 |
5.02046 | 2.894 | -0.012 |
318.055 | |
2 | 2.894 | -0.012 | |||||
3 | 2.894 | -0.012 | |||||
側分 18# | 1 |
2.50837 |
5.02174 | 0.695 | 0.411 |
31.030 | |
2 | 0.695 | 0.411 | |||||
3 | 0.695 | 0.411 | |||||
次粉 19# | 1 | 2.51341 | 5.00952 | 0.708 | 0.280 | 46.498 |
2 | 0.708 | 0.280 | |||||
3 | 0.708 | 0.280 | |||||
豆粕原料 (蛋白質 飼料) |
1# | 1 |
2.49879 |
5.00319 | 5.848 | 0.062 |
629.225 |
2 | 5.848 | 0.062 | |||||
3 | 5.848 | 0.062 | |||||
2# | 1 |
2.50170 |
5.00650 | 0.612 | 0.014 |
64.957 | |
2 | 0.612 | 0.014 | |||||
3 | 0.612 | 0.014 | |||||
3# | 1 |
2.50818 |
5.01943 | 0.640 | -0.010 |
70.421 | |
2 | 0.640 | -0.010 | |||||
3 | 0.640 | -0.010 | |||||
4# | 1 |
2.50830 |
5.00540 | 1.696 | -0.016 |
185.475 | |
2 | 1.696 | -0.016 | |||||
3 | 1.696 | -0.016 |
4.2、實驗結論
上海佳航Digipol-P610全自動旋光儀測試飼料中的淀粉含量測定,重復性好,而且操作簡單,非常適合于該類樣品 測試。
五、 注意事項
本方法不適用于含有在分析過程中具有光學活性,且不溶于 40%乙醇的淀粉以外的其他物質的產品, 如馬鈴薯漿,甜菜的絲、葉、根、冠,酵母,大豆產品,羽扇豆、富含葡萄糖的產品,如菊首根和菊芋等, 此時可用酶法測定淀粉含量,否者測定淀粉含量偏高或偏低。直鏈淀粉過 40%時,不宜用本法測定淀粉 含量,如高直鏈玉米淀粉。
參考文獻:
[1] GB/T 20194-2018 動物飼料中淀粉含量的測定 旋光法.[S]
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